全国免费电话:4008-217-320

如何提高MLR实验成功率?

如何提高

MLR实验成功率?

 
 
 
TPCS®提供MLR效应验证的
 
 
PBMC预筛服务
 
01

混合淋巴细胞培养(Mixed Lymphocyte Cultivate, MLC),又称为混合淋巴细胞反应(Mixed Lymphocyte Reaction, MLR),是一种测量药物的免疫调节作用(抑制正在进行的免疫反应)或免疫遗传学(诱导放大免疫反应)的方法。MLR通常用于测试免疫治疗药物,疫苗和其他免疫调节剂的功效。

 

MLR通常使用来自两组的淋巴细胞共培养,其中一组的淋巴细胞作为诱导细胞,另一组的淋巴细胞作为反应细胞,由于两细胞群表面的抗原决定簇互不相容,进而促使细胞活化、DNA合成和增殖。根据研究方案与实验目的,两组淋巴细胞可以来源于同一个体,也可以来源于不同个体。若将其中一组淋巴细胞先用丝裂霉素C(Mytomycine C)处理或射线照射使之细胞中DNA失去复制能力但仍能刺激另一组淋巴细胞活化、增殖,称为单向混合淋巴细胞培养(One Way MLR),反之,两组淋巴细胞均可活化、增殖则称为双向混合淋巴细胞培养(Two Way MLR)。

 

图一:基于PBMC+PBMC的MLR实验示意图

 

 
02

MLR实验可使用不同类别的淋巴细胞或相同类别的淋巴细胞,既可以直接使用PBMC,也可以分离纯化其中的亚群细胞后开展实验。常见的三种MLR实验包括:DC+T,PBMC+PBMC以及T+T。研究者需要根据候选药物作用机理以及研究目的综合判断MLR实验细胞类型。

 

基于DC+T的MLR是验证抗体药影响抗原呈递细胞效果的经典实验之一。选用两个不同供体的DC细胞与T细胞孵育,通过检测T细胞受DC激活增殖或细胞因子分泌的情况判断抗体药抗原呈递效果。

 

图二:基于DC+T的MLR实验示意图

 

03

受供体免疫状态影响,不同供体间DC与T的MLR效应差异较大,直接影响研究者对于MLR实验反应水平的判断。为了降低不同供体免疫状态的影响,3499com登录生物TPCS®提供MLR效应验证的PBMC预筛服务-利用流式细胞术以及ELISA分别检测不同供体淋巴细胞在梯度浓度阳性药物刺激下的增殖水平以及细胞因子分泌水平,研究者可根据TPCS®MLR数据利用PBMC自行分离亚群开展实验,或直接使用DC和T细胞复现MLR数据,3499com登录生物TPCS®竭诚为您提供多样化服务。

 

图三:3499com登录生物TPCS®基于DC+T的

MLR部分试验数据

 

澳门直营导航(Milestone Biotechnologies)是一家专注于民族品牌细胞研发、分离服务的公司。通过打造The Primary Cell Solution, TPCS®自主研发品牌,开展进口替代工作打破美欧发达国家对细胞原材料的垄断,3499com登录生物旨在解决我国生物医药产业的“卡脖子”环节,致力于成为细胞基因治疗领域内一站式服务提供商。

 

参考文献: 

  1. Bain, B. & Lowenstein, L. Genetic studies on the mixed leukocyte reaction. Science . (1964) doi:10.1126/science.145.3638.1315.

  2. Tourkova, I. L., Yurkovetsky, Z. R., Shurin, M. R. & Shurin, G. V. Mechanisms of dendritic cell-induced T cell proliferation in the primary MLR assay. Immunol. Lett. (2001) doi:10.1016/S0165-2478(01)00235-8.

  3. Lee, Y. E. et al. The synergistic local immunosuppressive effects of neural stem cells expressing indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) in an experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) animal model. PLoS One (2015) doi:10.1371/journal.pone.0144298.

  4. Matsui, F. et al. Induction of PIR-A/B+ DCs in the in vitro inflammatory condition and their immunoregulatory function. J. Gastroenterol. (2018) doi:10.1007/s00535-018-1447-1.

  5. Talwadekar, M. D., Kale, V. P. & Limaye, L. S. Placenta-derived mesenchymal stem cells possess better immunoregulatory properties compared to their cord-derived counterparts-a paired sample study. Sci. Rep. (2015) doi:10.1038/srep15784.

  6. Izrael, M. et al. Astrocytes Downregulate Inflammation in Lipopolysaccharide-Induced Acute Respiratory Distress Syndrome: Applicability to COVID-19. Front. Med. 8, 740071 (2021).

 
2022-09-20
浏览量:0